農(nóng)產(chǎn)品加工業(yè)
國家部委計劃
華中農(nóng)業(yè)大學(xué)
湖北 武漢市 洪山區(qū) 洪山區(qū)獅子山街一號
蛋清蛋黃中13 種功能成分提取純化技術(shù)：為獲得高活性高產(chǎn)率溶菌酶，采用離子交換吸附與超濾結(jié)合、集成濃縮、低溫噴霧等工藝，研究了離子交換樹脂種類、用量、吸附反應(yīng)時間、洗脫液濃度和洗脫時間等對溶菌酶提取效果的影響，將離子交換法制得的溶菌酶粗品用超濾法除鹽，研究了超濾除鹽過程中濃縮液體積、膜通量以及脫鹽率的關(guān)系，進(jìn)一步經(jīng)超濾濃縮后低溫噴霧干燥，溶菌酶得率91.6%，酶活力21500U/mg。設(shè)備簡單，處理量可調(diào)，樹脂易再生，大幅降低生產(chǎn)成本，條件溫和，不需酸堿，不導(dǎo)致蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)性質(zhì)的變化，生物活性保持良好。生產(chǎn)場地清潔衛(wèi)生，滿足GMP 生產(chǎn)規(guī)范，工藝先進(jìn)，操作簡便。 針對蛋黃為油溶性、免疫球蛋白（IgY）水溶性特點，采用低溫水相萃取、提油，聚乙二醇沉淀、離子交換色譜結(jié)合超濾濃縮、親和色譜純化等，建立高活性高純度雞蛋IgY 分離提取方法，純度95%以上，達(dá)藥品級標(biāo)準(zhǔn)；活性保持率73.77%（國際上35%左右）。通過單甲氧基聚乙二醇（mPEG）對IgY 修飾改性，IgY 活性保持率提高到90%。工藝條件溫和，無污染，成本低，生產(chǎn)周期短，節(jié)能減排顯著。 蛋清5種蛋白質(zhì)聯(lián)合提取純化技術(shù)：相繼研發(fā)了卵白蛋白、卵轉(zhuǎn)鐵蛋白、卵粘蛋白、卵巨球蛋白、S-卵白蛋白、卵類粘蛋白、抗生物素蛋白、核黃素結(jié)合蛋白、卵黃高磷蛋白等分離純化方法。以單功能成分分離純化為基礎(chǔ)，攻克了雞蛋清5 種功能蛋白質(zhì)聯(lián)合提取共純化技術(shù)與模式。本項目首先采用聚乙二醇將將蛋清分為四個組分，使卵粘蛋白、大部分的卵白蛋白與其他蛋清蛋白質(zhì)分離開來，以提高后續(xù)層析分離的選擇性；然后從蛋清組分一中純化出卵粘蛋白，溶菌酶、卵白蛋白、卵轉(zhuǎn)鐵蛋白和卵黃素蛋白4 種蛋白質(zhì)，通過Q Sepharose FF陰離子交換層析將4 種蛋白質(zhì)分別純化，實現(xiàn)了雞蛋清中5 種功能蛋白質(zhì)的聯(lián)合純化。 依托該技術(shù)已開發(fā)生產(chǎn)溶菌酶系列產(chǎn)品（粉狀、噴霧劑、漱口水）、卵粘蛋白抗病毒制劑、蛋白補(bǔ)鐵劑等系列產(chǎn)品，其中，卵轉(zhuǎn)鐵蛋白補(bǔ)鐵劑使我國補(bǔ)鐵食品由無機(jī)鐵型、有機(jī)鐵型、卟啉鐵型發(fā)展到蛋白鐵時代。
展開通過禽蛋單功能成分提取純化技術(shù)及其基礎(chǔ)研究，突破了雞蛋中多種功能蛋白質(zhì)聯(lián)合提取共純化技術(shù)。分別建立了溶菌酶、免疫球蛋白（IgY）、卵轉(zhuǎn)鐵蛋白、蛋黃卵磷脂（得到PC含16種分子結(jié)構(gòu)）、卵白蛋白、卵粘蛋白、卵巨球蛋白、S-卵白蛋白、卵類粘蛋白、抗生物素蛋白、核黃素結(jié)合蛋白、卵黃高磷蛋白等13種單功能成分分離純化方法。研究揭示了相應(yīng)功能成分純化方法、分子結(jié)構(gòu)、功能活性的“構(gòu)-效”“量-效”分子機(jī)制等基礎(chǔ)內(nèi)容。
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展開該成果授權(quán)發(fā)明專利4項，其中國家發(fā)明專利3項，美國專利1項（專利號：US 8574883B2、ZL 201210083362.2、ZL 201310073453.2、ZL 201410154251.5）。
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